細(xì)胞嵌入皿

如何選擇嵌入皿小室產(chǎn)品的孔徑？

首先需要明確您所進(jìn)行的應(yīng)用是否需要細(xì)胞穿過小室膜上的孔。一般來說，共培養(yǎng)實驗、Caco-2 Transport實驗及構(gòu)建細(xì)胞極化模型等不需要細(xì)胞穿膜，大多選擇0.4μm等小孔徑的產(chǎn)品。而在細(xì)胞遷移實驗及侵襲實驗中，細(xì)胞則需要穿過上室的膜、到達(dá)膜的背側(cè)（少數(shù)情況下會落至下室中，如懸浮細(xì)胞的遷移/侵襲實驗），因此需要選擇較大孔徑，（如腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲實驗常選擇8μm孔徑的產(chǎn)品）。

如何挑選小室膜的材質(zhì)？

潔特小室有聚碳酸酯（Polycarbonate, PC），聚酯（Polyesteror PolyethyleneTerephthalate，PET）兩種膜材質(zhì)。

PC和PET膜材質(zhì)應(yīng)用都很廣泛，二者的主要區(qū)別在光透性方面，即PC膜半透明，不太方便在培養(yǎng)的過程中觀察上室細(xì)胞的形態(tài)；PET膜透明，方便在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的狀態(tài)。

另外，在0.4μm孔徑下，PC膜和PET膜的孔密度（單位面積上的孔數(shù)量）不同，PC膜提供更高的膜孔密度。您可根據(jù)對實驗的要求（是否需要觀察細(xì)胞狀態(tài)，是否需要更高孔密度的膜）來選擇。

小室的膜材質(zhì)與細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶不同，細(xì)胞貼壁情況會有什么差異嗎？

未包被的小室膜材質(zhì)（PC或PET）雖與普通塑料細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶的材質(zhì)（Polystyrene, PS）不同，但膜的兩側(cè)均經(jīng)過組織培養(yǎng)表面處理（TissueCulture Treated, TC Treated），與一般做細(xì)胞培養(yǎng)的PS耗材的表面處理相同。因此，在正常情況下，細(xì)胞在小室內(nèi)的貼壁情況應(yīng)與培養(yǎng)皿/瓶中類似。在普通培養(yǎng)時需包被基質(zhì)蛋白等輔助貼壁的細(xì)胞，在小室上仍然需要包被。包被方法類似普通培養(yǎng)表面，可通過小室膜表面積換算所需包被液的量

小室產(chǎn)品可否滅菌后重復(fù)使用？

小室產(chǎn)品為一次性使用的耗材，不可重復(fù)使用。小室的孔板和膜的材質(zhì)均無法承受高壓蒸汽滅菌，且無法確認(rèn)重復(fù)使用的小室是否被徹底清潔，因此無法保障重復(fù)使用的實驗效果。

嵌入皿小室是否需要匹配特殊的接收板/下室產(chǎn)品?

與相應(yīng)規(guī)格的普通細(xì)胞培養(yǎng)多孔板（如TCP010006、TCP010012、TCP010024等）適配。

在接種細(xì)胞前，是否需要進(jìn)行“水化”？

大多數(shù)應(yīng)用并不需要額外進(jìn)行“水化”操作，該操作主要用于Matrigel預(yù)包被的侵襲小室，在使用前需平衡至室溫，并加入預(yù)溫至37攝氏度的無血清培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中水化兩小時。

少數(shù)情況下，提前在上下室加入培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)箱中預(yù)孵育大于1小時可幫助細(xì)胞貼壁，但大多數(shù)細(xì)胞可以直接接種。

接種細(xì)胞的加液順序如何？

一般先將預(yù)熱的培養(yǎng)基加入多孔板的孔中（下室），再輕輕將小室放入孔中。在放入時，建議將小室稍稍傾斜，一側(cè)先接觸液面，以免垂直放入在小室下生成氣泡。之后便可將混合均勻的細(xì)胞懸液加入小室內(nèi)部。

小室膜上既然有許多小孔，在包被基質(zhì)蛋白或一些單獨加液在上室的情況下，液體是否會很快漏至下室？

一般不會。小室的膜上的小孔孔徑有限，在表面張力的作用下，加入上室的包被液并不會很快漏下，如果短時間內(nèi)發(fā)現(xiàn)有液體大量滴下，需檢查小室的膜是否有裂痕或不完整的情況。

共培養(yǎng)實驗中，上下室接種細(xì)胞的位置一般如何安排？

由于小室膜上小孔的存在，上下室的培養(yǎng)基可以交流互通，接種在上下室的細(xì)胞是相互影響的。接種細(xì)胞的位置安排需考慮收集細(xì)胞、進(jìn)行下游檢測的方便程度，同時也需要考慮到上下室培養(yǎng)面積的差異（上室的有效生長面積比下室小，相應(yīng)地，接種的細(xì)胞量恐怕有差異），您可參考相關(guān)文獻(xiàn)或進(jìn)行預(yù)實驗來最終決定實驗安排。

小室內(nèi)接種的細(xì)胞可否消化收集？

可以的。您可采用在普通培養(yǎng)器皿中消化相應(yīng)細(xì)胞的試劑（如胰酶等），在上下室均加入推薦體積的消化液。

對小室內(nèi)接種的細(xì)胞進(jìn)行藥物處理時，藥物是僅需加入上室嗎？

由于小室膜上小孔的存在，我們建議您在上下室內(nèi)均加入含有同樣濃度藥物的培養(yǎng)基，以確保您的藥物處理濃度。

我們的耗材都是無DNA酶，無RNA酶并且無熱原嗎？
 
通常我們的產(chǎn)品都是無DNA酶，無RNA酶且無熱原的，但其他品類有個別產(chǎn)品可能不包含這些檢測項目，還請參考相應(yīng)產(chǎn)品的質(zhì)檢文件（COA）。

潔特有DEPC處理的耗材嗎？
 
DEPC處理是為了讓耗材不攜帶核酸酶，而潔特的耗材都是無DNA酶，無RNA酶的。這是基于我們從原料開始控制生產(chǎn)流程的結(jié)果。最終產(chǎn)品我們對核酸酶進(jìn)行質(zhì)量檢測，而不會額外加入DEPC處理步驟。其產(chǎn)品應(yīng)用與DEPC處理過的耗材是一致的，潔特產(chǎn)品可以代替DEPC處理耗材使用于分子生物學(xué)實驗中。

如何恰當(dāng)儲存潔特耗材產(chǎn)品？
 
除非有特別要求，一般潔特耗材產(chǎn)品應(yīng)存放于干燥的室溫環(huán)境，注意避開紫外，臭氧，廢氣，煙霧等極端條件。部分有特殊存儲要求的產(chǎn)品會在外箱標(biāo)簽標(biāo)示，敬請留意。

如果您購買的是特定的培養(yǎng)容器，建議查看產(chǎn)品說明書獲取準(zhǔn)確的生長面積和推薦的培養(yǎng)基添加量。同時，不同細(xì)胞類型對培養(yǎng)基的需求和接種密度也有所不同，培養(yǎng)時所需的培養(yǎng)基成分、接種量和培養(yǎng)條件都可能存在差異，還需要根據(jù)細(xì)胞的具體種類進(jìn)行調(diào)整。

TC-treated 就是組織培養(yǎng)（Tissue Cultured）處理表面的意思，潔特通過電暈放電或氣體等離子的手段提升聚苯乙烯（PS）表面的親水性，改善細(xì)胞貼壁所需蛋白的粘附情況從而幫助細(xì)胞貼壁。

懸浮細(xì)胞沒有細(xì)胞貼壁的需求，一般使用未處理表面培養(yǎng)耗材即可。TC處理表面也可培養(yǎng)懸浮細(xì)胞，但根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)和種類，可能會有一些細(xì)胞出現(xiàn)貼壁的現(xiàn)象

您可以選擇未處理表面的培養(yǎng)器皿自行包被細(xì)胞外基質(zhì)。當(dāng)然這種情況下TC處理表面的器皿也是可以使用的。